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上海起發paratechs 60010說明書

更新時間:2023-01-12      點擊次數:971

 

 

上海起發paratechs 60010說明書

mNSET Device for Mice 60010 Instructions for Non-Surgical Embryo Transfer

產品信息
目錄#60010
EtO(環氧乙烷)滅菌處理
每盒10個器械(器械單獨包裝,每個密封袋中有1個小窺器和1個大窺器。)
信息:非手術胚胎移植方法和設備,美國9615903。[PDF]
預期用途
該裝置用于將小鼠胚胎經宮頸倫理轉移到受體雌性小鼠體內。僅用于研究目的。不用于人類或動物的診斷或治療用途。
其他用途:mNSET 60010裝置也可用于人工授精(AI)或其他材料/病原體轉移到受體雌性小鼠體內。對于更大容量的傳輸,請考慮容量為20-40µl的mC&I設備(60020)。
處理
設備僅限一次性使用。使用后丟棄。
mNSET胚胎移植前
為了生產用于移植的小鼠胚胎和作為受體的假懷孕雌性,使用標準轉基因方法。¹按照標準轉基因程序,與雄性和雌性小鼠進行交配。如果需要,女性供體可以進行超排卵。胚胎在EmbrysMax®KSOM培養基(Millipore#MR-106-D)或所需培養基中孵育。胚胎應在交配后3.5天(3.5dpc)進行mNSET移植;受體雌性小鼠在mNSET轉移當天應為2.5dpc。
mNSET演示視頻
快速程序和完整程序演示視頻可在此處查看和下載。快速程序視頻演示了使用mNSET如何輕松完成小鼠子宮胚胎移植™ (非手術胚胎和精子移植)小鼠裝置60010。整個過程視頻詳細介紹了整個設置和準備過程,直到實際過程結束。
胚胎移植程序
1.將15μl培養基滴到60mm組織培養皿(Falcon 353002或類似物)的蓋子上。
2.使用標準胚胎處理移液管將12–20個囊胚加載到培養基中。(注意:移植胚胎的最佳數量將根據小鼠品種和胚胎接受的操作而變化。)
3.將mNSET裝置放置在已設置為1.8μl的P-2移液管上(推薦的移液管為Rainin Classic PR2移液管,0.1-2μl或Gilson移液管P2,0.2-2μl)
4.將移液管柱塞按到第一個停止位置,將mNSET裝置的尖d降低到培養基中,然后將胚胎緩慢拉入尖d。從介質上取下mNSET裝置尖d。
5.小心地將移液管設置為2.0μl,以在mNSET尖d產生一個小氣泡,以確保胚胎在插入小鼠期間留在裝置尖d內。輕輕地將移液管放置在一邊(靠近籠子),以便在步驟9中使用。避免碰撞mNSET尖d。
6.將未麻醉的受體雌鼠放在帶有金屬絲架的籠子頂部,讓鼠標“抓住”籠子桿表面。用拇指和食指抓住尾巴底部,將尾巴向上傾斜,同時用手的另一邊輕輕按壓尾巴底部。

 

小鼠用mNSET設備60010有用提示
以下是我們的科學家、技術人員和客戶提供的提示和建議,這些提示和建議被證明是有用的。
1.在開始mNSET試驗之前,請仔細閱讀所有“有用提示”和mNSET for Mouse 60010說明書。指令插入可以在NSET的每個框中找到。
2.在實際實驗之前,在沒有胚胎的2.5 dpc假懷孕小鼠上練習mNSET技術。
3.mNSET設計為緊貼Rainin Classic PR2,0.1-2µl或Gilson Pipetman P2,0.2-2µl移液管,用于裝載胚胎并精確測量設備尖d的培養基。
4.我們建議使用有意識、冷靜和未交配的小鼠。這使得小鼠更容易在自然位置找到并進入子宮頸。我們網站上視頻中的雌性老鼠沒有服用鎮靜劑。
5.我們使用CD1小鼠,強烈建議將該菌株用于假妊娠受體。我們建議使用體重≥26g且至少60天大的小鼠。
6.胚胎應孵育至囊胚期(e3.5),因為該設備將它們轉移到子宮角之一而不是輸卵管。一些最終用戶已成功使用桑椹胚。
7.選擇一種你使用過的培養基,它能讓你在孵化胚胎時獲得*佳成功。例如,使用M2或KSOM培養基,移植12至20個胚胎。
8.mNSET裝置僅能在發情的某些階段以及在假懷孕小鼠中以2.5dpc通過子宮頸。因此,我們強烈建議使用2.5 dpc假懷孕小鼠(塞子脫落后)進行訓練和使用mNSET裝置進行胚胎移植。
9.我們發現,將老鼠放在籠子頂部,用鐵絲架讓它抓住籠子桿表面,這樣可以相對容易地讓雌性動物保持靜止,減少蠕動。使用mNSET說明第6條中所述的保持技術,
10.我們不建議使用潤滑劑。您可以使用無菌水或培養基濕潤窺器,然后在插入陰道之前去除多余的水分。
11.將小窺器輕輕插入陰道。老鼠天生會把窺器推出一點。輕輕地將其壓回原位,使mNSET裝置可以穿過子宮頸并進入子宮角之一。
12.可選:取下小窺器,更換為大窺器。如果需要,使用適當的光源,如鵝頸燈,并觀察宮頸。
13.使用NSET尖d發現和穿透宮頸時,要耐心,不要施加太大壓力。這可能會導致組織損傷,并可能使mNSET裝置尖d彎曲,使其幾乎無法使用。如果第一次嘗試插入mNSET的位置不正確,請輕輕重新定位設備并重復。
14.如果在發現頸部開口時施加過大壓力,導致尖d彎曲,則可能發生胚胎丟失。同樣,溫和的反復嘗試與mNSET的成功有關。
15.當mNSET裝置的轂接觸窺器末端時,您將知道該裝置通過宮頸正確插入子宮。
16.要排出胚胎,請將移液管柱塞按到第一個停止位置。數到3。不要松開柱塞。
17.在不釋放移液管柱塞的情況下緩慢移除mNSET。如果在取出之前釋放柱塞,一些胚胎可能會被拉回尖d。
18.使用后在顯微鏡下檢查mNSET尖d是良好的做法。清晰的尖dmNSE顯示尖d內部的可視化效果。
該設備僅設計用于一次性使用。重復使用會用宮頸組織堵塞mNSET尖d。重復使用可能會使導管變得柔韌,不再堅硬,無法通過宮頸。因此,可能會將胚胎植入陰道,而不是預期的子宮角。

 

 

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