IPTG 是一種半乳糖類似物，它是不可代謝的，它使 lac 阻遏物失活以誘導(dǎo)大腸桿菌中 β-半乳糖苷酶的合成. 受 lac 操縱子控制的克隆基因的表達(dá)是由 IPTG 誘導(dǎo)的。IPTG 常用于誘導(dǎo)重組蛋白，是硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙酰酶的底物，據(jù)報(bào)道可在細(xì)菌中誘導(dǎo)青霉素酶。IPTG 常用于需要誘導(dǎo) β-半乳糖苷酶的克隆程序，最常與 X-Gal 一起用于藍(lán)/白菌落篩選。GoldBio 是市場(chǎng)上*成本效益的 IPTG，不會(huì)犧牲質(zhì)量或純度。Gold Biotechnology IPTG 是經(jīng)過驗(yàn)證和發(fā)布的™，是一種更好的方式來生成您需要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，

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IPTG如何誘導(dǎo)lac操縱子？

IPTG 類似于乳糖代謝物異乳糖，通過與 lac 阻遏物結(jié)合來誘導(dǎo) lac 操縱子。一旦 IPTG 與 lac 阻遏物結(jié)合，就會(huì)發(fā)生構(gòu)象變化，導(dǎo)致 lac 阻遏物與 lac 啟動(dòng)子分離。一旦 lac 阻遏物解離，RNA 聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合以啟動(dòng)表達(dá)。

應(yīng)使用多少 IPTG 進(jìn)行表達(dá)/應(yīng)使用什么濃度的 IPTG 進(jìn)行表達(dá)？

大多數(shù)論文建議使用 0.1mM – 1.0 mM IPTG 進(jìn)行表達(dá)。但是，您應(yīng)該使用的量取決于您的蛋白質(zhì)。但是，最好在 0.01mM – 1.0mM 范圍內(nèi)運(yùn)行 IPTG 滴定，并使用 SDS-PAGE 進(jìn)行比較以確定最佳濃度。需要記住的是，較高濃度的 IPTG 會(huì)導(dǎo)致包涵體。

你如何溶解IPTG？

IPTG 可以溶解在無菌水中。

制作新鮮的 100mM IPTG 原液：

• 重 0.238 克 IPTG

• 加入 10 ml 無菌 H2O。*溶解。

• 預(yù)潤(rùn)濕 0.22 µm 注射器過濾器，吸取 5-10 ml 無菌 H2O 并棄水。

• 通過準(zhǔn)備好的 0.22 µm 注射器過濾器對(duì) IPTG 庫存進(jìn)行消毒。

• 以 1 ml 等分試樣在 -20°C 下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá) 1 年。

您如何存儲(chǔ) IPTG？

在 -20°C 下儲(chǔ)存干燥的粉末 IPTG。避光。對(duì)于 IPTG 儲(chǔ)備溶液，在 -20°C 下以 1 ml 等分試樣儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá) 1 年。

IPTG有什么用途？

IPTG 的主要應(yīng)用包括：

• 誘導(dǎo)蛋白

• 使用X-Gal進(jìn)行藍(lán)白色篩選