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lucernatechnologies OBI說明書

更新時(shí)間:2021-08-02      點(diǎn)擊次數(shù):1408


Lucerna, Inc. 是一家生物技術(shù)工具公司,專注于開發(fā)和商業(yè)化熒光適體 (Spinach™) 技術(shù),其目的是:1.) 提供即插即用的 RNA 成像和檢測系統(tǒng)作為研究試劑,2.) 開發(fā)高- 通量篩選平臺(tái),以實(shí)現(xiàn)以前難以處理的目標(biāo)的新藥物發(fā)現(xiàn),以及 3.) 開發(fā)用于工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用的熒光傳感器。

Lucerna 由康奈爾大學(xué)科學(xué)家創(chuàng)立,他們是 Spinach™ 技術(shù)的發(fā)明者,并已發(fā)表了 20 多篇關(guān)于該技術(shù)的文章。創(chuàng)始團(tuán)隊(duì)在 RNA 生物學(xué)、適體開發(fā)、化學(xué)生物學(xué)和熒光成像領(lǐng)域展示了專業(yè)知識(shí)。此外,Lucerna 科學(xué)家在 RNA 生物學(xué)、熒光成像、高通量篩選和檢測開發(fā)方面擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)。


lucernatechnologies OBI說明書

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信息

3,5-difluoro-4-hydroxybenzlidene-imidazolinone-2-oxime-1-benzoimidazole (OBI)

 

 

分子式:

C 19 H 13 F 2 N 5 O 3

 

分子量:

397.34

 

CAS 名稱/編號:

 

熒光光譜

RedBroccoli TM /OBI 在 pH 7.4 緩沖液中的吸收和熒光發(fā)射光譜。

 

演示: 凍干染料

 

儲(chǔ)存條件:-20 oC 下避光保存 2 年。

 

質(zhì)量保證:產(chǎn)品通過1 H NMR 和 LC-MS進(jìn)行分析, 并通過 HPLC 提供純度 > 95%。

 

使用聲明:本產(chǎn)品僅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未經(jīng)授權(quán)的商業(yè)用途、體外診斷用途、離體或體內(nèi)治療用途或任何類型的食用或應(yīng)用于人類或動(dòng)物。由于熒光團(tuán)和適體的高度特異性,我們無法預(yù)測 Lucerna TM 產(chǎn)品在其客戶系統(tǒng)中的表現(xiàn),也無法對其負(fù)責(zé)。使用 Lucerna TM 產(chǎn)品的研究人員應(yīng)進(jìn)行優(yōu)化研究,以實(shí)現(xiàn)其預(yù)期應(yīng)用的最佳結(jié)果。

 

數(shù)據(jù)

圖 1. Red Broccoli TM -OBI 復(fù)合物在細(xì)胞和體外表現(xiàn)出更高的光穩(wěn)定性。Red Broccoli TM熒光團(tuán)(OBI 與 BI,各 20 µM)的細(xì)胞內(nèi)光穩(wěn)定性通過對 Red Broccoli TM表達(dá)細(xì)胞的連續(xù)照射進(jìn)行評估。Red Broccoli TM -OBI 在超過 10 秒的時(shí)間內(nèi)保持了 >75% 的紅色熒光,而 Red Broccoli TM -BI 在約 0.2 秒內(nèi)失去了約 50% 的綠色熒光。比例尺,10 µm。

 

 

圖 2. OBI 增強(qiáng)的細(xì)胞穩(wěn)定性能夠使用基于 Red Broccoli TM的 SAM 生物傳感器對哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的內(nèi)源性 SAM 動(dòng)力學(xué)進(jìn)行成像。(a)本實(shí)驗(yàn)中使用的SAM傳感器示意圖。( b ) 表達(dá)基于Red Broccoli TM的 SAM 傳感器(頂部)或單獨(dú)的Red Broccoli TM(底部)的 HEK293T 細(xì)胞使用 10 µM OBI 成像。在 0 分鐘用 50 mM 環(huán)亮氨酸處理以阻止 SAM 生物合成的傳感器表達(dá)細(xì)胞顯示細(xì)胞熒光迅速降低。120 分鐘后,將培養(yǎng)基更換為不含環(huán)亮氨酸的培養(yǎng)基(“洗出"),熒光隨時(shí)間恢復(fù)至基線水平。僅表達(dá) Red Broccoli TM 的細(xì)胞隨著時(shí)間的推移保持一致的紅色熒光。比例尺,20 µm。

 

 

圖 3.  BI 和 OBI 是 Broccoli TM和 Red Broccoli TM 的“即插即用"熒光團(tuán)。表達(dá)紅花椰菜、花椰菜或?qū)φ?RNA 的 HEK293T 細(xì)胞與 10 µM OBI ( ac ) 或 BI ( df )一起孵育。OBI 在表達(dá)紅花椰菜和西蘭花的細(xì)胞中均表現(xiàn)出紅色熒光,而 BI 在表達(dá)紅花椰菜和西蘭花的細(xì)胞中均表現(xiàn)出綠色熒光。但是在具有任一熒光團(tuán)的對照 RNA 表達(dá)細(xì)胞中均未觀察到熒光。細(xì)胞核用 Hoechst-33342 染色劑(藍(lán)色)標(biāo)記,并用 DAPI 和用于 BI 的 FITC 過濾器立方體或用于 OBI 的 TRITC 過濾器立方體成像。比例尺,10 µm。

 

參考

使用基于基因編碼的紅色熒光 RNA 傳感器對活哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi) S-腺苷甲硫氨酸動(dòng)力學(xué)進(jìn)行成像。Li X、Mo L、Litke JL、Dey SK、Suter SR、Jaffrey SR。J Am Chem Soc。2020 年 8 月 19 日;142(33):14117-14124。

 

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