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bioacademia 02-012說明書

更新時間:2020-12-15      點擊次數:1087

 bioacademia 02-012說明書

Taq-DNA聚合酶經濟性(-dNTPs),具有強健的緩沖液
02-012  200件,02-012-5 5件x 200件
儲存:儲存溫度-20?C。
濃度:5單位/μl
*注:一個單位是指能將10 nmol的總dNTPs并入的酶量
當激活的鮭魚精子DNA被用作
模板/底漆。
儲存緩沖液:20毫米Tris HCl(pH 8.0),100毫米KCl,0.1毫米EDTA,1毫米DTT,50%甘油,0.5%
吐溫20,0.5%Igepal CA-630。
提供試劑:10 x強效緩沖液(Taq)
應用:
1) 高通量PCR
2) 菌落PCR
3) dUTP、dITP和熒光標記核苷酸的摻入
4) 底漆延伸
5) 在3’-鈍端添加一個單核苷酸(腺苷),用于克隆到TA載體。
背景:水熱菌DNA聚合酶(taqdna聚合酶)在大腸桿菌中表達
量大,純度高。該酶具有耐熱DNA聚合酶活性,且
分子量為94 kDa。這種酶適用于PCR反應;能夠用不同的
底漆。
質量保證:通過SDS-PAGE(CBB染色)測定純度大于95%(圖1)
證實缺乏核酸內切酶和核酸外切酶。
PCR檢測:以?DNA為模板進行PCR反應,擴增結果良好,達14個
kB(圖2)。
使用強效緩沖液(Taq)的注意事項:強效緩沖液可誘導大限度的酶活性。避免
在凝膠電泳分析中產生不希望出現的條帶,宜反應時間為
建議如下:1)模板延伸時間約為5至10秒/kb,模板延伸時間為8kb,以及
大約15秒/kb,多14kb;2)用2步PCR設置大致相同的延長時間
(穿梭PCR)和三步PCR;3)在沒有擴增的情況下,通過小步延長延伸時間
看到。采用二步PCR方法可以更快地檢測到擴增產物。

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