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proteos哺乳動物細胞表達

更新時間:2020-12-03      點擊次數(shù):1823

 

全長IgG抗體,F(xiàn)(ab)和(Fab')2抗體片段以及抗體融合蛋白的表達和純化。我們的抗體生產(chǎn)能力包括構建體設計,瞬時哺乳動物細胞表達,利用內(nèi)部或客戶提供的表達載體以及親和純化。我們提供分子和酶促方法來生成F(ab)和(Fab')2抗體片段。

 

抗體生產(chǎn)

通過SDS-PAGE進行蛋白A純化的IgG分析

Proteos提供全長IgG抗體,F(xiàn)(ab)和(Fab')2抗體片段以及抗體融合蛋白的生產(chǎn)。我們的抗體生產(chǎn)能力包括構建體設計,利用內(nèi)部或客戶提供的表達載體進行瞬時哺乳動物細胞表達以及親和純化。提供的其他純化服務包括在一次生產(chǎn)運行中多10克抗體的尺寸排阻色譜,通過透析進行的緩沖液交換,內(nèi)毒素測試,分析SEC和SDS-PAGE(還原和非還原)。

我們行業(yè)的瞬態(tài)表達平臺利用表達Epstein-Barr病毒(EBV)核抗原1的*授權的HEK(人類倉鼠卵巢)和CHO(中國倉鼠卵巢)細胞系,以及包含EBV復制起點(OriP)的專有表達載體允許游離質(zhì)粒擴增和高水平重組蛋白表達。

我們還提供細胞系擴增,冷凍保存和客戶提供的細胞系庫。總庫將專門為客戶的瞬時或穩(wěn)定蛋白質(zhì)生產(chǎn)項目而維護,并將根據(jù)其要求銷毀或退還。

我們利用經(jīng)過優(yōu)化和經(jīng)過充分驗證的哺乳動物細胞表達方案,在無血清搖瓶培養(yǎng)體積為30 mL至60 L批次大小的情況下獲得一致,可再現(xiàn)的蛋白表達。僅無支原體,高存活率,低傳代培養(yǎng)用于轉染,并使用Beckman Coulter Vi-cell XR監(jiān)測培養(yǎng)密度,存活率和平均細胞直徑。Vi-cell XR使用錐蟲藍染料排除方法,平均50次測量結果以計算每個樣品的參數(shù)。這使我們能夠高度準確地監(jiān)測培養(yǎng),這對于蛋白質(zhì)生產(chǎn)項目的質(zhì)量和可重復性至關重要。每個項目隨附的定制技術報告中均包含所有細胞培養(yǎng)數(shù)據(jù)。

從構建體設計開始,抗體生產(chǎn)的典型生產(chǎn)時間為6-8周。  

全面的生產(chǎn)服務:

  • 全套分子生物學服務可與我們的任何表達平臺一起提供,包括構建體設計,融合伴侶和親和標簽選擇,帶有密碼子優(yōu)化的基因合成,亞克隆,無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA分離和序列驗證。
  • 在小于100 mL的培養(yǎng)規(guī)模上進行表達驗證和優(yōu)化;非常適合并行表達測試多種抗體。
  • 以30毫升的培養(yǎng)規(guī)模平行生產(chǎn)8組抗體的中等通量生產(chǎn)。多可以并行生產(chǎn)48個抗體。
  • 在1 L至4 L的培養(yǎng)規(guī)模上進行中試規(guī)模生產(chǎn)和產(chǎn)量測定;大規(guī)模生產(chǎn)之前通過純化進行過程驗證的理想選擇。
  • 在搖瓶培養(yǎng)體積不超過60 L的HEK或CHO細胞中制備規(guī)模的重組全長IgG,抗體片段或抗體融合蛋白。
  • 抗體表達服務可以與Proteos的純化服務結合使用,以實現(xiàn)*定制的蛋白質(zhì)生產(chǎn)過程。

其他抗體服務:

  • 酶促處理全長IgG以生產(chǎn)F(ab)或F(ab')2抗體片段
  • 從血清,腹水或其他BSL-1生物體液中純化IgG
  • 抗體同型測定
  • 抗體標記(HRP,生物素,F(xiàn)ITC等)
  • 抗原產(chǎn)生 

proteos哺乳動物細胞表達

Proteos可在哺乳動物細胞中表達重組蛋白和抗體,包括適當?shù)姆g后修飾。這些翻譯后修飾通常是有效分泌和功能所必需的,這就是為什么在需要生物功能蛋白的情況下,優(yōu)選哺乳動物細胞生產(chǎn)的原因。

我們行業(yè)的瞬態(tài)表達平臺利用表達Epstein-Barr病毒(EBV)核抗原1的*授權的HEK(人類倉鼠卵巢)和CHO(中國倉鼠卵巢)細胞系,以及包含EBV復制起點(OriP)的專有表達載體允許游離質(zhì)粒擴增和高水平重組蛋白表達。

我們還可以在客戶提供的細胞系中提供細胞系擴增,儲存和瞬時表達。

我們經(jīng)過優(yōu)化和充分驗證的哺乳動物細胞表達方案可在無血清搖瓶培養(yǎng)體積為每批30 mL至60 L的范圍內(nèi)提供一致,可再現(xiàn)的蛋白質(zhì)表達。僅使用無支原體,高存活率,低傳代培養(yǎng)物進行轉染,并使用Beckman Coulter Vi-CELL XR監(jiān)測其培養(yǎng)物密度,存活率和平均細胞直徑。Vi-CELL XR使用錐蟲藍染料排除方法,平均50次測量值以計算每個樣品的參數(shù)。這使我們能夠高度準確地監(jiān)測培養(yǎng),這對于蛋白質(zhì)生產(chǎn)項目的質(zhì)量和可重復性至關重要。每個項目隨附的定制技術報告中均包含所有細胞培養(yǎng)數(shù)據(jù)。

從構建體設計到純化的蛋白質(zhì),典型的生產(chǎn)時間為6-8周。

服務包括:

  • 全套分子生物學服務可與我們的任何表達平臺一起提供,包括構建體設計,融合伴侶和親和標簽選擇,帶有密碼子優(yōu)化的基因合成,亞克隆,無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA分離和序列驗證。
  • 在小于100 mL的培養(yǎng)規(guī)模上進行表達驗證和優(yōu)化;并行測試多個重組蛋白靶標的理想選擇。
  • 在1 L至4 L的培養(yǎng)規(guī)模上進行中試規(guī)模生產(chǎn)和產(chǎn)量測定;大規(guī)模生產(chǎn)之前通過純化進行過程驗證的理想選擇。
  • 在搖瓶培養(yǎng)物中,HEK或CHO細胞中重組蛋白的制備規(guī)模生產(chǎn),批量大可達到60L。
  • 交付選項包括細胞糊劑,條件培養(yǎng)上清液,濃縮緩沖液交換的培養(yǎng)上清液或膜制劑。
  • 哺乳動物細胞表達服務可以與Proteos的純化服務結合使用,以實現(xiàn)*定制的蛋白質(zhì)生產(chǎn)過程。

 

 

 

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