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DNA污染去除酶說明書

更新時間:2019-11-26      點擊次數:2269

 

 

DNA污染去除說明書

英文名稱:HL-dsDNase

中文名稱:熱敏雙鏈特異性核酸酶

產地:挪威

品牌:ArcticZymes

應用:去除RNA樣品中的基因組DNA污染

儲存和運輸:-20度存儲 干冰運輸

有效期:-20度3年

單位定義:1單位指在25℃標準反應條件下,每分鐘OD260增加0.001(約每分鐘消化1pmol核酸底物)所需的酶量。

 

簡介:制備RNA時基因組DNA污染將會干擾下游PCR或Northern Blot實驗。用RNase-free的DNase消化DNA也會導致RNA降解。熱敏雙鏈DNA特異性核酸酶(Heat labile ds-DNA-specific Nuclease,又名ezDNase或HL dsDNase),為雙鏈特異性核酸酶。其特異性的識別降解雙鏈DNA,對單鏈DNA或RNA幾乎無活性,其降解dsDNA的能力比ssDNA高~5000倍。除此外,該雙鏈DNA特異性核酸酶降解雙鏈DNA的能力比bovine DNaseI高~30倍,因此特別適用于去除RNA樣品中的基因組DNA污染。該熱敏型雙鏈DNA核酸酶可將DNA降解為2~8bp的產物,且55℃ 5min可使該酶不可逆失活,同時又能保持RNA和ssDNA的穩定性,因此產物無需再純化,可直接用于后續反應。同時該酶與M-MLV和AMV的反應Buffer都是兼容的,可應用于反轉錄反應中去除樣本中基因組DNA的污染,提高反轉錄效率。

 

注意事項:

(1)1×dsDNase Buffer:20mM Tris-HCl pH8, 2mM MgCl2。該酶需要1~3mM MgCl2。
(2)該酶對DTT敏感,任何反應體系中不得包含DTT。
(3)通常在RT反應中的用量為0.1~0.5U/20 μl體系。
(4)任何濃度的SDS、鹽酸胍、β-mercaptoethanol或高鹽離子(>300mM)均抑制該酶活性。
(5)該酶的宜反應溫度為25~37℃,42℃ 30min后活性損失70%。

 

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品牌

70800-201

HL-dsDNase

250U

2u/ul

125ul

5250

ArcticZymes

70800-202

HL-dsDNase

1000U

2u/ul

500ul

15575

ArcticZymes

70800-203

HL-dsDNase

2500U

5u/ul

500ul

35000

ArcticZymes

 

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