国产成人av在线_av在线不卡网站_欧美在线观看一区二区三区_欧美精品一区二区三区在线四季_大尺度AV无码污污福利网站_国产精品日韩在线一区

您好!歡迎訪問上海起發實驗試劑有限公司網站!
全國服務咨詢熱線:

15921799099

當前位置:首頁 > 技術文章 > Cytoskeleton AKL95-C說明書

Cytoskeleton AKL95-C說明書

更新時間:2018-08-17      點擊次數:2174

 

Cytoskeleton,Inc。很高興為藥物篩選,信號轉導和細胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產品。我們專注于生產純化蛋白質和易于使用的試劑盒,以研究生物化學和細胞過程。我們的試劑盒可用于少量樣品,用于基礎研究或小屏幕(Biochem Kits™),也可用于大屏幕的高通量樣品CytoDYNAMIX Screens™)。

除了我們現有的產品,我們還在產品線中為微管,微管蛋白,運動蛋白,小G蛋白效應物,GAP,GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務。

 

結合蛋白質

· 概述

· 關于

· CITATIONS

· 常見問題解答

 

測定所有肌動蛋白結合蛋白(ABP)以確保其活性與公布的值相當。測定因產品而異,包括F-肌動蛋白切斷測定,F-肌動蛋白激活的ATP水解和肌動蛋白聚合測定。顯示了測量WASP VCA結構域蛋白在肌動蛋白聚合中的作用(右)。

 

Cytoskeleton,Inc。銷售一系列純化的肌動蛋白結合蛋白。所有Cytoskeleton的肌動蛋白結合蛋白都具有高純度,并經過嚴格的生物活性測試。細胞骨架還為肌動蛋白結合蛋白研究提供肌動蛋白,抗體和試劑盒。

 

由Arp2 / 3和WASP VCA結構域刺激的肌動蛋白聚合。試劑盒BK003用于研究Arp2 / 3(Cat。#RP01)和WASP VCA(Cat。#VCG03)結構域對肌動蛋白聚合的影響。

肌動蛋白與細胞中的多種蛋白質相互作用
*,F-和G-肌動蛋白與細胞中的多種蛋白質相互作用(14)??。目前有超過150種已知的肌動蛋白結合蛋白(ABP),其占細胞蛋白的約25%。ABP在肌動蛋白細胞骨架上賦予大量功能多樣性,其涉及諸如肌肉收縮,唇形突破,細胞運動,胞質分裂和細胞質流動的過程。研究這些過程如何調節肌動蛋白絲功能和動力學是一個重要且不斷增長的研究領域。

可以通過使用生物化學,遺傳學和免疫學方法分離和研究肌動蛋白結合蛋白。因為存在超過50種類型的肌動蛋白結合蛋白,所以用于鑒定它們的方法及其功能/活性也是多種多樣的。肌動蛋白親和柱通常用于親和純化ABP,無論它們是F-或G-肌動蛋白結合。可以通過利用芘肌動蛋白熒光的聚合增強來進行顯示潛在ABP影響肌動蛋白動力學的簡單測定(參見測量肌動蛋白聚合物部分)。這種性質的研究有助于鑒定新的肌動蛋白結合蛋白。有幾篇值得一讀的關于識別和量化新肌動蛋白結合蛋白的可能方法的評論(15,16,17)?

問題1:哪種肌動蛋白結合蛋白(ABP)可用作F-肌動蛋白結合對照? 

答案1:肌動蛋白結合蛋白α-輔肌動蛋白(Cat。#AT01)是一種F-肌動蛋白結合和交聯蛋白,使其可用作F-肌動蛋白結合研究的對照。它的Kd是1μM,這意味著在該濃度下發生50%結合。因此,我們的目標是使用 2μM的α-肌動蛋白作為結合測定中的陽性對照。在結合反應中,2μM濃度的α-輔肌動蛋白相當于0.23μg/μl。此外,α-輔肌動蛋白對pH敏感,其高親和力發生在pH 7.0。

 

問題2:Cytoskeleton的肌球蛋白或重的meromyosin是否具有F-肌動蛋白活力? 

答案2:遺憾的是,我們不會出售運動級肌球蛋白或重肌紅蛋白用于肌動蛋白運動試驗。我們發現質量控制測試非常難以復制,因此我們無法充分確保試劑的質量。因此,肌球蛋白(Cat。#MY02MY03)和重型meromyosin蛋白(Cat。#MH01)不推薦用于F-肌動蛋白運動測定。已經測試過這些試劑的客戶在運動方面沒有取得很好的成功,因此我們不建議購買樣品進行測試。如果需要運動級肌動蛋白或重型meromyosin,我們建議遵循原始方案(Kron和Spudich,1985)并在液氮中冷凍100μl等分試樣以確保穩定性。

    參考文獻:  SJ Kron和JA Spudich,1985年。熒光肌動蛋白絲在固定在玻璃表面的肌球蛋白上移動。PNAS,83,6272-6276。

 

結合蛋白質系列產品:

 

PHDG1

Acti-stain 488 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDH1

Acti-stain 555 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDN1

Acti-stain 670 phalloidin

ea

cytoskeleton

BK001

Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

BK003

Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

AKL95

Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AD99

Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

AS99

Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle

ea

cytoskeleton

AKL99

Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AKF99

Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AP05

Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

PHDG2

Acti-stain 488 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDH2

Acti-stain 555 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDN2

Acti-stain 670 phalloidin

ea

cytoskeleton

BK005

Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

BK007

Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

AKL96

Actin protein (>96% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AD100

Actin protein (>100% pure): bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

AS100

Actin protein (>100% pure): chicken gizzard muscle

ea

cytoskeleton

AKL100

Actin protein (>100% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AKF100

Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AP06

Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

PHDG3

Acti-stain 488 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDH3

Acti-stain 555 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDN3

Acti-stain 670 phalloidin

ea

cytoskeleton

BK009

Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

BK011

Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

AKL97

Actin protein (>97% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AD101

Actin protein (>101% pure): bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

AS101

Actin protein (>101% pure): chicken gizzard muscle

ea

cytoskeleton

 

肌動蛋白(純度> 95%):兔骨骼肌

Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle

 

1x1毫克(Cat。#AKL95-B)

5x1 mg(Cat。#AKL95-C)

產品用途包括

· 肌肉肌動蛋白結合蛋白的鑒定和表征

· 體外肌動蛋白聚合研究

· Western印跡分析的抗體標準


從兔骨骼肌中純化出肌動蛋白材料。 AKL99肌動蛋白純度大于99%,AKL95純度大于95%。肌肉肌動蛋白的分子量約為43kDa。兔肌肉肌動蛋白作為白色凍干粉末提供。凍干的蛋白質在4℃下干燥至<10%濕度時保存6個月。當再 在蒸餾水中構成為10毫克/毫升,該蛋白質是在以下緩沖液:5mM的的Tris-HCl pH 8.0中,0.2毫米氯化鈣2,0.2mM的ATP,5%蔗糖和1%的葡聚糖。

純度
通過在12%聚丙烯酰胺凝膠上掃描Coomassie Blue染色蛋白的光密度測定法測定純度。AKL99由> 99%純肌肉肌動蛋白組成,而AKL95純度> 95%(見圖1)。

 

 

 

 


圖1:圖1.兔骨骼肌肌動蛋白的純度。在SDS-PAGE凝膠上運行100μg> 99%純(AKL99)和> 95%純(AKL95)兔骨骼肌肌動蛋白,并用考馬斯藍染色。箭頭表示肌動蛋白,箭頭表示α-肌動蛋白污染物(115kDa)。純化的肌動蛋白中的微量雜質主要是肌動蛋白結合蛋白,例如α-肌動蛋白和凝溶膠蛋白。

 

生物活性
肌肉肌動蛋白的生物活性由其在體外有效聚合成長絲(F-肌動蛋白)的能力和在旋轉分析中與未聚合組分分離的能力決定。嚴格的質量控制確保AKL99產生> 90%的F-肌動蛋白,AKL95在該測定中產生> 80%的F-肌動蛋白。

 

問題1:儲存肌動蛋白的*方法是什么,以確保大的穩定性和保質期?

答案1:   細胞骨架提供我們所有的肌動蛋白作為凍干粉末,以便它們可以在室溫下運輸。收到后,凍干粉末應在4℃下儲存在帶有干燥劑的密封容器中。重要的是監測干燥劑的新鮮度并確保其繼續吸收水分以保護凍干的肌動蛋白。妥善儲存后,凍干肌動蛋白保證自購買之日起6個月內保持穩定?;蛘?,肌動蛋白可立即以推薦的濃度重新懸浮,等分,在液氮中快速冷凍并儲存在-70℃。冷凍的等分試樣可穩定6個月。解凍冷凍等分試樣時,重要的是在室溫水浴中解凍。

 

問題2:聚合后儲存F-肌動蛋白的*方法是什么?

答案2:   G-肌動蛋白在4°C下穩定2天,需要二價陽離子,pH 6.5 - 8.0和ATP穩定性。F-肌動蛋白是穩定的,可以在4°C下儲存1-2周。F-肌動蛋白需要ATP(0.2mM)和Mg2 +(2mM)的穩定性,并且在pH6.5和pH8.5以下是不穩定的。F-肌動蛋白對冷凍不穩定。F-肌動蛋白可以轉移到各種緩沖液(例如HEPES,磷酸鹽等)而沒有不利影響。我們建議在4°C下儲存F-肌動蛋白時,添加抗菌劑,如100μg/ ml氨芐青霉素和10μg/ ml氯霉素。

 

Mohammad等,2012。Flightless I是一種粘附相關的肌動蛋白加帽蛋白,可調節細胞遷移。FASEB?。doi:10.1096 / fj.11-202051。

Reay等,2012。核因子κB抑制對血清型9腺相關病毒(AAV9)微小肌營養不良蛋白基因轉移至mdx小鼠的影響。摩爾。醫學。v 18 pp 466-476。

Windhorst等,2011。肌醇-1,4,5-三磷酸-3-激酶-A對惡性轉化細胞運動的功能作用。詮釋。J.癌癥。第129卷,第1300-1309頁。

Arora等,2004。凝溶膠蛋白通過rac依賴性步驟介導膠原蛋白吞噬作用。摩爾。生物學。細胞。第15卷,第588-599頁。

Ishikawa等,2004。來自低溫電子顯微鏡的棘阿米巴肌球蛋白IC尾的子域組織。PROC。國家科??茖W院。科學。美國。第101卷,第12189-12194頁。

Balcer等,2003。通過高分子量Srv2 / CAP復合物,cofilin,profilin和Aip1協調調節肌動蛋白絲轉換。CURR。生物。第13卷,第2159-2169頁。

Loomis等,2003.Espin交聯導致體內微絨毛型平行肌動蛋白束的延長。J. Cell Biol。第163卷,第1045-1055頁。

Upadhyaya等,2003。通過使用肌動蛋白推進的脂質囊泡探測聚合力。PROC。國家科。科學院。科學。美國。第100卷,第4521-4526頁。

Humphries等,2002。通過肌動蛋白結合蛋白冠狀蛋白直接調節Arp2 / 3復合物的活性和功能。J. Cell Biol。第159卷,第993-1004頁。

Sagot等,2002。由Bni1和profilin介導的肌動蛋白成核機制。納特。細胞生物學。第4卷,第626-631頁。

Engqvist-Goldstein等,2001。肌動蛋白結合蛋白Hip1R在胞吞作用的早期階段與網格蛋白結合并在體外促進網格蛋白裝配。J. Cell Biol。第154號,第1209-1223頁。

 

 

貨號

品名

規格

品牌

BK165-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK165

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK163-S

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK163

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK160-S

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK160

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK162-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK162

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK161-S

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK161

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

AAC04-Beads

Acetyl-Lysine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

APY03-Beads

Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM11-Beads

SUMOylation 1 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM24-Beads

SUMOylation 2/3 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

UBA01-Beads

Ubiquitination Affinity Beads

ea

cytoskeleton

CIG02-Beads

Acetyl-Lysine Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG03-Beads

SUMO1 IP Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG01-Beads

IgG Control Beads

ea

cytoskeleton

CUB02-Beads

Ubiquitination Control Beads

ea

cytoskeleton

BLR01

BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit

ea

cytoskeleton

BLR02

BlastR™ Rapid Filtration Kit

ea

cytoskeleton

AAC02

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1)

ea

cytoskeleton

AAC03

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC03-HRP

Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC01

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20)

ea

cytoskeleton

APY03

Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

APY03-HRP

Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

ASM01

SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16)

ea

cytoskeleton

ASM24

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2)

ea

cytoskeleton

ASM23

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

ASM23-HRP

SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

AUB01

Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

AUB01-HRP

Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

PHDG1

Acti-stain 488 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDH1

Acti-stain 555 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDN1

Acti-stain 670 phalloidin

ea

cytoskeleton

BK001

Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

BK003

Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

AKL95

Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AD99

Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

AS99

Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle

ea

cytoskeleton

AKL99

Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AKF99

Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AP05

Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

APHR

Actin protein (rhodamine): human platelet

ea

cytoskeleton

AR05

Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AT01

Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

RP01P

Arp2/3 protein complex: porcine brain

ea

cytoskeleton

CS-TFC01

Cardiac Thin Filament Complex (CTFC)

ea

cytoskeleton

CF01

Cofilin 1 protein: human recombinant

ea

cytoskeleton

HPG6

Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant

ea

cytoskeleton

MH01

Heavy meromyosin protein

ea

cytoskeleton

CS-MH03

Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment)

ea

cytoskeleton

CS-MYS03

Myosin - cardiac S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS04

Myosin - skeletal muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS05

Myosin - smooth muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

MY02

Myosin II protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

MY03

Myosin protein: bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

PR02

Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant

ea

cytoskeleton

PHDR1

Rhodamine Phalloidin

ea

cytoskeleton

CY-SC001

SiR-Actin Kit

ea

cytoskeleton

CY-SC013

SiR700-Actin Kit

ea

cytoskeleton

VCG03

WASP protein VCA domain: GST tagged: human

ea

cytoskeleton

 

 

 

上海起發實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商

1:強大的進口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

2:產品種類齊全,經營超過700多品牌,基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。

3:提供加急服務,貨品一般1-2周到貨。

4:富有競爭力的價格優勢,絕大部分價格有優勢。

5:多年積累良好的信譽,大部分客戶提供貨到付款服務。客戶包括清華、北大、交大、復旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、國藥、fisher等知藥企。

6:我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權代理。

7:我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發,歡迎合作。

 

上海起發實驗試劑有限公司
地址:上海浦東川沙鎮川沙路6619號上海起發實驗試劑有限公司
郵箱:xs1@78bio.com
傳真:021-50724961
關注我們
歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關注我們的微信公眾號
了解更多信息
主站蜘蛛池模板: japanese在线观看_亚洲精品黄网站_精品在线一区二区三区_双乳奶水饱满少妇视频_亚洲日本韩国欧美_欧美不卡一区二区_日韩免费大片_国产精品不卡一区二区三区 | 国产真实伦在线观看视频_亚洲免费播放_亚洲高清v_成人h动漫在线看_成年免费a级毛片免费看_青草视频在线观看视频_狠狠干美女_aa毛片a级毛片免费观看 国内精品久久久久影院蜜芽_一级不卡_亚洲国产成人久久综合_yy1111111少妇影院光屁股_国产乱淫av免费_中文字幕高清不卡_538国产精品视频一区二区_国产精品91久久久 | 99久久精品国产免费看不卡_好紧好湿太硬了我太爽了_欧美激情一区二区三区视频_宅男天堂_精品三级久久久_gogogo高清在线观看视频中文_免费国产白丝喷水娇喘视频site:_青青草视频黄 | 北条麻妃中文_eeuss影院www影院入口_亚洲视频在线观看一区_最新日韩视频在线观看_久久久久久久久久亚洲_天天操网址_久久成人无码影片_免费无码又爽又刺激高潮 | 亚洲91网_成人影院网站ww555久久精品_日本在线观看视频一区_国产一级第一级毛片_jizzjizz日本护士视频_久久99精品国产91久久来源_久久久av免费观看_免费看久久久 | 国产亚洲三级_蝌蚪自拍网_99热福利_亚洲成aⅴ人在线观看_国产精品伦子XXX视频_麻豆三区_日本大尺度无删减在线观看_女人高潮一级片 | 亚洲视频欧美视频_欧美性欧美巨大黑白大战_国产伦子系列沙发午睡_日本xxxx在线观看_女同一区二区_国产黄色激情视频_国产精品午夜爆乳美女视频_国产麻传媒精品国产AV | 少妇厨房愉情理9仑片视频_成人免费在线观看网址_国产成人无码精品一区不卡_久久看av_97超碰福利久久精品_美女一级黄色大片_国产欧美日韩一区二区三区四区_亚洲AV嫩草AV极品A片 | 五月丁香啪啪中文字幕_国产欧美日韩精品一区二区被窝_国产欧美校园小说在线_国产一区视频在线播放_久久精品视频99_欲帝精品福利视频导航_国产成人综合一区人人_黄色免费一级 | 137日本免费肉体摄影_伊人365_日韩欧美一区二区在线_无码中文字幕VA精品影院_亚洲AV福利无码无一区二区_深夜影院在线观看_被黑人猛男连续高潮视频_aa国产精品 | 久久久久99精品国产片_日韩a级毛片免费观看久久_三级aa毛片_国产又粗又大久久久久久_欧美日韩免费在线观看视频_欧美日夜夜逼_第一色网站_99久久精品国产高清一区二区 | 97精品国产三级A∨在线_欧美一级专区_国产九九99久久99大香伊_宝贝腿抬高点让我爽一点麻豆_97青草超碰久久国内精品91_成人免费乱码大片a毛片视频网站_av三级_久在线中文字幕乱码免费 | 国产一级性片_性欧美另类_精品视频一区二区在线_国产成人无码AⅤ片在线观看_国产一级一级一级_一级黄色大片在线_国产a爱_在线看片日韩 | 偷拍各种美女wc嘘嘘视频_亚洲精品乱码久久久久久按摩_成人免费xyz网站_朝桐光a∨一区二区三区_国内精品卡1卡2卡区别_欧美国产一级_亚洲AV综合A∨一区二区_自拍超碰 | 免费网站高清观看素材_人妻蜜と1~4中文字幕月野定规_97超碰免费在线_中文字幕在线人_亚洲色无码A片一区二区潘甜甜_欧美中文一区二区三区_想要xx·m3u8色视频_亚洲av中文无码4区免费 | 无码高潮喷吹在线播放亚洲_日本午夜在线视频_国产免费牲交视频_久久精品区_日日夜夜精_亚洲国产精品激情在线观看_亚洲sm另类一区二区三区_精品久久影视 | 午夜簧片_日韩视频在线一区二区三区_a级免费_美女日p视频_日本孕妇高潮孕交视频_久久久免费视频网站_秋霞AV鲁丝片一区二区_国产精品一区av | 裸体在线国模精品偷拍_国产欧美日韩一区二区在线_国产高清无码专区_成人免费xxxxxx视频_免费同性男男自慰网站_日本网址在线观看_国产亚洲AV无码乱码在线观看_大卫科波菲尔1999 | 19禁国产精品福利视频_www黄在线观看_日韩av无码久久一区二区_97超碰国产在线_中文字幕.亚洲无码日_成人免费无码A毛片_青青草在久久免费久久免费_国产午夜性春猛交ⅹxxx | 特大巨人黑人AAA片BBC_www.色涩涩.com网站_1024国产精品视频一区_欧美自拍亚洲综合在线_老外黑人欧美一级毛片_91精品啪在线观看国产商店_免费的青榴视频在线观看_国产不卡av在线播放 | 人妻暴雨中被强制侵犯_久久久久久久无码高潮_欧美xxxx做受欧美88bbw_国产男女猛视频在线观看_啦啦啦免费视频播放_99视频福利_99re这里只有精品在线_老司机成人精品视频 | 中文人字幕第三页_无码纯肉视频在线观看_99re国产在线播放_日本欧美高清全视频_日韩七区_亚洲第一最快AV网站_中日韩欧美风情视频_欧美成人一区二 | 国产区综合_精品一区二区免费视频视频_国产精品乱子乱XXXX_久久综合性_亲含舔丰满湿插_国产高清乱码又大又圆_久久免费看少妇高潮a片特黄网站_亚洲综合久 | 亚洲欧洲中文字幕_精品少妇一区二区_av明星换脸无码精品区_sybil在线观看_av网站国产_精品蜜臀AV在线天堂_国产熟妇搡bbbb搡bb七区_国产成人a在线观看视频 | 狠狠色丁香婷婷综合橹88_国产精品入口传媒小说_午夜精品老牛av一区二区三区_www.日本精品_久久精选视频_精品国产综合二区亚洲_www天天干com_麻豆传媒在线免费看 | 狠狠干黄色_丝袜视频一区二区三区_www成人免费视频_国产精品免费视频网站_大香伊蕉中文字幕_91色交_日韩1区2区_国产熟睡乱子伦午夜视频麻豆 | 第一福利导航导航_国产激情久久久久久熟女老人AV_丁香五月七月综合激情_久草毛片_91亚色视频在线观看_日本女优一区_日日躁夜夜躁狠狠躁av麻豆_国产精品乱码久久久久久久久 | 成人无码视频在线观看网站_快色91_国产欧美日韩一区二区三区在线_在线看黄色_极品销魂美女一区二区_无码成人一区二区三区_videos日本多毛hd护士_人妻互换HD无码中文在线 | 国产视频h_国产日韩视频_日日插天天操_成人宗合_日韩国产一区二区三区四区五区_亚洲AV永久无码精品桃花岛知道_www.日本在线_淫视频网站 | 人操人爱_欧美日一区_国产精品盗摄!偷窥盗摄_免费的网站永久免费_嫩草www_国产成人精彩在线视频九色_黄色日本片_国产精品传媒入口麻豆 | 中文字幕在线观看三区_国产三级农村妇女在线播放_国产91在线看_玩弄chinese丰满人妻videos_国产一区二区三区视频免费_久艹久久_成人网子_91女女互慰吃奶在线 | 国产成人无码精品久久久性色_国产精品呻吟久久av图片_男人激烈吮乳吃奶视频免费_www.伊人.com_亚洲日韩中文无码久久_欧美人与动性行为视频_黄色在线视屏_国产色综合一区 | 国产精品久久久久久妇女_曰本女人与公拘交酡免费视频_97就去干_cba今日赛事回看_国产一级高清_www.亚洲资源_铠甲勇士52集免费观看_性色欲情网站IWWW九文堂 | 亚洲第一色图_免费的日批视频_超碰97在线播放_激情综合丁香五月_蜜臀av入口_亚洲欧美婷婷五月色综合_www高清_日韩在线免费 | 伊人一本在线_亚洲AV永久无码精品国产精_久久精品岛国AV一区二区无码_亚洲欧洲精品成人久久av18_美女视频一二三区_国产黄色录像一级片_91视频综合网_九九热有精品 | 亚洲色欲久久久综合网东京热_国产毛片久久久久久美女视频_欧美一级日韩片_99精品网站_www.久久免费_99久无码中文字幕一本久道_在线中文字幕亚洲日韩2020_免费播放黄色片 | 中文字幕国产_亚洲精品影院_麻豆av高清_无码中文亚洲AV影音先锋_国产97久久_精品一区二区三区视频_欧美在线视频网_男人影院在线观看www | 精品va久久久噜噜久久软件_慈禧秘传免费看_成人成人成人在线视频_俺去俺来也www色老板_99国产99_天天干夜夜_亚洲欧美小视频_国产一区不卡视频 | 成人黄色一级毛片_特大巨黑吊性XXXX_亚洲大片一区二区三区_国产乱子伦无码精品小说_永久网站_国产交换3p国产精品_欧美丰满少妇xxⅹ_日本aⅴ中文 | 中国的黄色一级片_日韩美女视频一区二区_91先生在线观看_a级欧美_国产在线观看一区二区三区精品_亚洲黄毛片_久操成人_国产伦精品一区二区三区照片91 | 久久国产热播_天天艹天天干天天_caoporn视频在线_亚洲一级特黄_一二三级毛片_日韩在线亚洲_欧美日韩国产精品一区_免费观看性欧美大片无片 |