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Enzymatics L6090L 說明書

更新時間:2018-04-11      點擊次數(shù):1658

 

 

貨號:L6090L

品名:E. coli DNA Ligase(大腸桿菌DNA連接酶)

產(chǎn)品描述:

大腸桿菌 DNA連接酶催化DNA末端的相鄰5'磷酸和3'羥基之間形成磷酸二酯鍵,需要NAD +和Mg 2+作為輔因子。相對于粘性DNA末端連接和缺口密封,平末端DNA的連接是非常低效的。

 

規(guī)格:

2,500 U

濃度

10,000 U/ml

保存

-25°C至-15°C

純度(SDS-PAGE)

> 99%

活性:

20,000 - 28,880 U/mg

SS核酸外切酶

100 U < 2.0% released

DS核酸外切酶

100 U < 1.0% released

DS內(nèi)切核酸酶

100 U = no conversion

大腸桿菌 DNA污染

50 U <10 copies

 

蛋白質(zhì)來源

大腸桿菌表達(dá)質(zhì)粒編碼大腸桿菌DNA連接酶的基因。

 

提供

10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
50% glycerol
pH 7.5 @ 25℃

 

隨附:

 

B6090 (10X E.coli DNA Ligase Reaction Buffer)

10X E.coli DNA Ligase Reaction Buffer (B6090):
300 mM Tris-HCl
40 mM MgCl2
260 uM NAD
10 mM DTT
0.5 mg/mL BSA

 

單位定義 
1單位定義為在25℃下30分鐘內(nèi)連接100ng DNA的片段的50%與粘性末端所需的大腸桿菌 DNA連接酶的量。

 

質(zhì)量控制分析

 

單位表征測定
單位活性使用2倍系列稀釋法測量。在1X反應(yīng)緩沖液中制備酶的稀釋液并加入到20μL含有雙鏈DNA的片段和1X反應(yīng)緩沖液的反應(yīng)中。將反應(yīng)在25℃(室溫)孵育30分鐘,在冰上浸入,并在用溴化乙錠染色的1%瓊脂糖凝膠上分析。

 

蛋白質(zhì)濃度(OD 280)測量使用使用2.0mg / ml BSA樣品(Pierce Cat#23209)標(biāo)準(zhǔn)化的Nanodrop ND-2000分光光度計
在OD 280處分析2.0μL酶樣品,并用產(chǎn)品儲存溶液沖切。使用34,280的消光系數(shù)和73,606道爾頓的分子量將觀察到的3個重復(fù)樣品的平均測量結(jié)果轉(zhuǎn)換為mg / mL。

 

SDS-Page(物理純度評估)

將2.0μL酶溶液加載到變性的4-20%Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上,該凝膠側(cè)翼為寬范圍的MW標(biāo)記和2.0μL的1:100稀釋的樣品。電泳后,將凝膠染色并比較樣品以確定物理純度。該測試的驗收標(biāo)準(zhǔn)要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質(zhì)條帶的質(zhì)量,確認(rèn)濃縮樣品的純度大于99%。

 

污染測試

 

單鏈核酸外切酶活性

將含有10,000cpm放射性標(biāo)記的單鏈DNA底物和10μl酶溶液的50μL反應(yīng)物在37℃下溫育4小時,導(dǎo)致TCA可溶性計數(shù)的釋放小于2.0%。


雙鏈核酸外切酶活性將含有5,000cpm放射性標(biāo)記的雙鏈DNA底物10μl的50μL反應(yīng)液和在37℃下孵育4小時的酶溶液導(dǎo)致少于1.0%的TCA可溶性計數(shù)釋放。


雙鏈核酸內(nèi)切酶活性將含有0.5μgpBR322 DNA和100單位酶溶液的50μL反應(yīng)液在37℃下溫育4小時,結(jié)果通過瓊脂糖凝膠電泳測定,沒有視覺上可辨別的轉(zhuǎn)化為帶切口的環(huán)狀DNA。

 

腸桿菌 16S rDNA污染測試
將酶溶液的重復(fù)樣品變性,并使用對應(yīng)于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物,在TaqMan qPCR測定中篩選污染性大腸桿菌基因組DNA的存在。測試的驗收標(biāo)準(zhǔn)是由3個重復(fù)的無模板對照樣品的平均值產(chǎn)生的閾值循環(huán)計數(shù)(C t)。基于無模板對照 Ct值與標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性,該測定的檢測限為<10拷貝基因組/樣品。

 

 

 

部分產(chǎn)品信息:

貨號

品名

規(guī)格

濃度

品牌

N2070-10-L

 ATP Solution 

50 µmol

10 mM

Enzymatics

N2050-10-L

10 mM dNTP Solution Mix

100 µmol

10 mM

Enzymatics

N2010L

100 mM 75µmol dNTP Solution Set 

75 µmol

100 mM

Enzymatics

N2010-A-L

100 mM dATP Solution 

75 µmol

100 mM

Enzymatics

N2050L

100µmol dNTP Solution Mix 

100 µmol

25 mM

Enzymatics

Y9180L

10x Uracil Cleavage System 

750 Reactions

N/A

Enzymatics

P7670

2x HiFi PCR Master Mix 

1 rxn

2x

Enzymatics

Y9420L

5x ER/A-Tailing Enzyme Mix 

24 reactions

N/A

Enzymatics

Y9380L

E. coli Pyrophosphatase 

50 U

100 U/mL

Enzymatics

Y9030L

E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein 

1.5 mg

2.75 mg/ml

Enzymatics

Y9140-HC-L

End-Repair Mix (High Concentration) 

75 Reactions

1 Rxn/µL

Enzymatics

Y9140-LC-L

End-Repair Mix (Low Concentration) 

200 Reactions

1 Rxn/µL

Enzymatics

Y9080L

Endonuclease VIII 

10,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

P7600L

EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-) 

10,000 U

200,000 U/mL

Enzymatics

X8010L

Exonuclease I 

30,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

X8020L

Exonuclease III 

50,000 U

100,000 U/ml

Enzymatics

P7010-HC-L

Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration) 

10,000 U

50,000 U/ml

Enzymatics

P7010-LC-L

Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration) 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7060L

Klenow Fragment 

2,500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

X8030L

Lambda Exonuclease 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7040L

M-MuLV Reverse Transcriptase 

100,000 U

200,000 U/ml

Enzymatics

P7090L

Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-) 

3,000 U

30,000 U/ml

Enzymatics

P7140-HC-L

Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration) 

100,000 U

400,000 U/ml

Enzymatics

P7140-LC-L

Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration) 

100,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

P7610L

NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions 

250 Reactions

2X

Enzymatics

P7590L

Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase 

500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7460L

Poly(A) Polymerase 

1,000 U

5,000 U/mL

Enzymatics

Y9260L

RecA 

1.5 mg

2.0 mg/mL

Enzymatics

Y9220L

RNAse H 

5,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

Y9240L

RNAse Inhibitor 

20,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

L6010L

T3 DNA Ligase 

900,000 U

3,000,000 U/ml

Enzymatics

L6030-LC-L

T4 DNA Ligase 

150,000 U

120,000 U/ml

Enzymatics

L6030-HC-L

T4 DNA Ligase (Rapid) 

240,000 U

600,000 U/ml

Enzymatics

P7080L

T4 DNA Polymerase 

2,000 U

3,000 U/ml

Enzymatics

Y9130L

T4 Gene 32 Protein 

1.0 mg

10 mg/mL

Enzymatics

Y9040L

T4 Polynucleotide Kinase 

10,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

L6050L

T4 RNA Ligase 1 

10,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

L6080L

T4 RNA Ligase 2 

4,500 U

30,000 U/ml

Enzymatics

L6070L

T4 RNA Ligase 2 Truncated 

500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

L6020L

T7 DNA Ligase 

900,000 U

3,000,000 U/ml

Enzymatics

P7260L

T7 DNA Polymerase 

3,500 U

10,000 U/ml

Enzymatics

P7180L

T7 RNA Polymerase 

50,000 U

50,000 U/ml

Enzymatics

L6060L

Taq DNA Ligase 

20,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

P7110L

Taq DSC 2.0 DNA Polymerase 

1,250 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7250L

Taq-B DNA Polymerase 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7620L

TaqIT 

5,000 U

50,000 U/mL

Enzymatics

P7070L

Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT) 

6,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

G5020L

Thermolabile UDG 

500 U

1,000 U/ml

Enzymatics

Y9370L

Thermostable Pyrophosphatase 

1,250 U

2,000 U/ml

Enzymatics

G5010L

Uracil DNA Glycosylase 

10,000 U

2,000 U/ml

Enzymatics

P7511L

VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase 

500 U

2,000 U/ml

Enzymatics

P7520L

VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase 

500 U

2,000 U/ml

Enzymatics

L6030-W-L

WGS Ligase 

24 Reactions

N/A

Enzymatics

P7640L

ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit 

1000 Reactions

N/A

Enzymatics

P7020-HC-L

φ29 DNA Polymerase (High Concentration) 

2,000 U

100,000 U/ml

Enzymatics

P7020-LC-L

φ29 DNA Polymerase (Low Concentration) 

2,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

 

世界*實驗材料供應(yīng)商 Enzymatics正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國代理, Enzymatics在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國科研客戶帶來的產(chǎn)品,的服務(wù),簽約 Enzymatics就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

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酶產(chǎn)品在生命科學(xué)研究中是*的重要工具,在科學(xué)研究中對于其性能、純度和穩(wěn)定性的要求日益提升。基因公司*代理的酶產(chǎn)品專家—Enzymatics一貫為客戶提供zui高質(zhì)量和*價值的產(chǎn)品,因此我們竭誠向您推薦 Enzymatics產(chǎn)品。

Enzymatics公司建立于2006年,專門從事開發(fā)、制造和分銷酶產(chǎn)品,致力于酶產(chǎn)品研發(fā),為市場帶來了特殊的、高品質(zhì)的產(chǎn)品。 Enzymatics公司建立了嚴(yán)格完整的操作體系,通過了ISO13485:2003和9001:2000體系標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證,并符合FDA 21 CFR.820質(zhì)量系統(tǒng)法規(guī)中對于常規(guī)用途試劑的生產(chǎn)規(guī)范。同時Enzymatics的生產(chǎn)能力被許多FDA認(rèn)證的醫(yī)療設(shè)備制造商以及的ISO認(rèn)證機構(gòu)TüV SüD 認(rèn)可。

 

 

我們公司zui大優(yōu)勢是強大的采購,

1:基本什么都能進(jìn)口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進(jìn)口的,

2:貨品全,現(xiàn)經(jīng)營過700多個品牌,基本所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口,特別是冷偏的產(chǎn)品那就更有優(yōu)勢,

3:提供加急服務(wù),一般1-2周到貨,超過時限加急費全免

4:價格公道,絕大部分價格有優(yōu)勢,當(dāng)然不能保證100%產(chǎn)品都是,因為意味著沒有服務(wù).

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7:我們還是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批發(fā),歡迎合作。

上海起發(fā)實驗試劑有限公司
地址:上海浦東川沙鎮(zhèn)川沙路6619號上海起發(fā)實驗試劑有限公司
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